初發爲外生殖器部位的炎性小丘疹。24-48小時後，迅速形成膿皰，3-5天后膿皰破潰後形成潰瘍，境界清楚。潰瘍呈圓形或橢圓形，邊緣爲鋸齒狀，其下緣有潛蝕現象，周圍呈炎症紅暈。潰瘍底部有黃色豬油樣膿苔，並覆蓋很多膿性分泌物，剝去膿苔可見出血，潰瘍基底部見豐富的紅色肉眼組織增生。疼痛明顯。觸診柔軟稱此爲軟下疳。
一、診斷軟下疳的必備條件
專家介紹，一般講，診斷軟下疳要特別謹慎，因爲目前本病並不常見，但是如符合如下條件者可以作出診斷。
1、發病前有不潔性交史。
2、男女生殖器及尿道口出現一個或更多的潰瘍，基底軟，有疼痛與觸痛。
3、單側腹股溝橫痃，疼痛，潰瘍排膿。
4、暗視野檢查梅毒螺旋體陰性。
5、塗片作姬姆薩染色查不到多諾萬小體（由日本人宮川發現的一種導致性病性淋巴肉芽腫的致病菌）。
6、梅毒血清試驗陰性。
7、革蘭氏染色，可查到陰性鏈球菌，但可產生假陽性，有條件者可作細菌培養。
二、診斷軟下疳的實驗室檢查
專家解釋，由於本病目前屬於少發性性病，診斷軟下疳應特別慎重。必要的實驗室檢查是診斷軟下疳的關鍵。最簡單的實驗方法是革蘭氏染色塗片。有條件的應作細菌培養和組織病理檢查。
1、塗片檢查
從潰瘍處取材作塗片時，由於膿性分泌物中的雜菌易使結果混淆，故應先將潰瘍清洗乾淨，塗片可用革蘭氏染色或姬姆薩染色。杜克雷菌在塗片中爲短小（2μm）的呈平行直線排列的二極染色菌，革蘭氏染色陰性。如果有典型的症狀，實驗室又能查到杜克雷菌，本病即可診斷。
2、細菌培養
常用的培養基有淋球菌胎牛血清瓊脂、巧克力馬血瓊脂，取標本時應將潰瘍表面的痂皮和碎屑去掉，用滅菌拭子採取分泌物和潰瘍的基底部物質。將標本接種於平皿上，劃線分離。平皿放入5%～10%二氧化碳和飽和溼度的環境中，於33℃～35℃至少培養48小時看結果。杜克雷菌的菌落較小，如針尖大小，光滑，呈半球形。但菌落常呈不同的形狀，可呈半透明狀、淺灰色和膚黃色等。菌落的特點是緊密，如用接種環觸之，幾乎整個菌落在培養基上滑動。
對培養出的菌落可用氧化酶試驗、硝酸鹽還原試驗、對輔酶Ⅰ和氯化血紅素等試驗，根據不同需要加以鑑定；也可用過氧化氫酶、吲哚、尿素酶、糖的利用試驗等加以鑑定。對菌珠進行鑑定是診斷軟下疳所必需的。有些不具備條件的實驗室，一發現有細菌生長即診斷本病，是不科學的。
3、組織病理檢查
對軟下疳患者進行必要的組織病理檢查有助於對本病的診斷。組織病理顯示3個帶，上層爲潰瘍底部，較狹窄，可見嗜中性白細胞、纖維蛋白、壞死組織及革蘭氏陰性桿菌；中層頗寬，含多數新生血管，血管內皮細胞增生，血管腔閉鎖，血栓形成；下層在真皮深部，爲緻密的漿細胞和淋巴細胞浸潤。
